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#Tendenze
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RWD TriColor Multichannel Fiber Photometry System R820 per la regolazione del segnale neurale
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Ottieni una maggiore velocità e migliora l'efficienza del tuo esperimento!
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Panoramica
Un nuovo potente sistema di fotometria a fibra con un corpo leggero integrato e caratteristiche software più ricche può registrare il segnale di fluorescenza rosso e verde, come GCaMP, RCaMP, dLight e jrGECO1a, mentre un LED unico da 410nm viene utilizzato per acquisire i segnali di controllo ed escludere il rumore.
Il sistema di fotometria a fibre registra i cambiamenti nell'intensità di fluorescenza dei neuroni in una specifica area del cervello per riflettere l'attività della popolazione neuronale. R820 ha tre lunghezze d'onda, 410nm, 470nm e 560nm, di cui 410 è usato per acquisire il segnale di riferimento ed eliminare il rumore.
Applicazioni principali:
1. Ca2 + e rilevamento del segnale del neurotrasmettitore
2.Studiare la funzione dei circuiti neurali
3.Esplorare i meccanismi delle malattie neurologiche
4.Sviluppare una nuova sonda sensore fluorescente
5.Esperimento di principio ottico
Principio:
La fotometria a fibre è una tecnologia per rilevare l'attività dei neuroni nel nucleo del cervello di animali in movimento libero. Somma la fluorescenza globale dei neuroni che esprimono un indicatore di calcio geneticamente codificato (GECI) e sonde di neurotrasmettitori. Può essere usato per esplorare i meccanismi di regolazione dietro il comportamento animale.
Nella fotometria a fibre, i dati sono raccolti analizzando il cambiamento di fluorescenza (ΔF) rispetto alla fluorescenza iniziale di base (F) e osservando il cambiamento del segnale corrispondente al transiente di calcio (ΔF/F). Queste metriche sono solitamente basate su fluorofori come GFP, RFP, tdTomato, mCherry, ecc, di cui GCaMP è l'esempio più comune.
Nei neuroni, gli ioni di calcio regolano diversi processi importanti, tra cui il rilascio di neurotrasmettitori e l'eccitabilità di membrana. GCaMP può fornire una visione critica delle dinamiche del calcio, in quanto GCaMP diventa fluorescente solo quando è legato agli ioni di calcio. Sulla base di principi simili, i sistemi di fotometria a fibre possono anche rilevare i cambiamenti nella concentrazione di neurotrasmettitori.
(Sonde di neurotrasmettitori - cpEGFP è incorporato in un recettore specifico neurotrasmettitore, e il legame del recettore al neurotrasmettitore innesca un cambiamento conformazionale nel recettore per convertire in un segnale fluorescente, e questa sonda geneticamente codificabile è espresso in cellule o cervello di topo da iniezione virale, trasfezione, e altri mezzi tecnici)
Vantaggi:
1. Integra l'acquisizione dei dati, l'analisi e il tracciamento
Il software Bonsai e la programmazione MATLAB non sono necessari. L'analisi dei dati include il ritaglio dei dati, la correzione dello sbiancamento, lo smoothing, la correzione del movimento, la mappa di calore degli eventi, le statistiche di picco e l'area sotto la curva e la mappa di calore della traiettoria del comportamento.
2. Sincronizzazione e marcatura di più eventi comportamentali
Il software può sincronizzare e contrassegnare più eventi comportamentali speciali o segnali di input esterni durante l'esperimento.
3. Segnale più accurato, evita le interferenze
Doppio rilevatore altamente sensibile che permette la rilevazione indipendente e sequenziale per evitare l'interferenza dell'eccitazione e della rilevazione della fluorescenza, acquisendo un segnale più accurato. La sorgente luminosa a 410nm può essere utilizzata per riflettere il segnale di rumore di fondo, garantendo così l'acquisizione di dati di fluorescenza reali.
4. Facile connessione ad altre apparecchiature
Interfaccia a 4 ingressi e 4 uscite per una facile connessione con altre apparecchiature come l'optogenetica e l'elettrofisiologia per lo studio a circuito chiuso della stimolazione e della registrazione.
5. Supporto di 9 canali
Supporto fino a 9 canali, adatto per l'esperimento simultaneo di più animali o posizioni multiple del cervello
Specifiche
Lunghezza d'onda della luce di eccitazione: 410nm 470nm 560nm
Potenza: Min 0µW, Max≥100µW, regolabile con una precisione di 0.1µW
Numero di canali: 9
Frame rate di campionamento fluorescente: Max 300fps
Interfaccia del segnale digitale: 4Input 4Output
Uscita del segnale: Frequenza di uscita 0-500Hz, larghezza e durata dell'impulso di uscita regolabile
Marcatura: Marcatura manuale (10), marcatura automatica (4), marcatura ROI (9)
Macchina fotografica di comportamento: 1920*1080(30fps) 1280*720(60fps) Commutabile tra più frame rate di risoluzione
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