Come migliorare il tasso di successo della costruzione del modello MCAO？

Questo articolo ti introduce alla procedura e ai punti cruciali che ti aiuteranno a migliorare la tua percentuale di successo.

(1) Fissare il ratto anestetizzato sul tavolo operatorio in posizione supina. Radere il sito chirurgico e condurre la disinfezione. Utilizzare la forbice o il bisturi oftalmico convenzionale per creare un'incisione al centro del collo, quindi utilizzare una pinzetta per eseguire la dissezione smussata del tessuto ghiandolare e della fascia per esporre e separare CCA, ECA e ICA.

(2) Separare l'ICA e la corrispondente arteria pterigopalatina. Utilizzare la sutura chirurgica per legare l'arteria pterigopalatina con un nodo scorsoio o bloccare l'arteria pterigopalatina direttamente con un morsetto vascolare. Questa operazione potrebbe evitare l'inserimento della sutura nell'arteria pterigopalatina, assicurandosi che ICA sia l'unico ramo aperto di CCA.

(3) Separare il tronco dell'ECA e utilizzare la penna per coagulazione elettrica per bloccare il ramo dell'ECA. Legare l'estremità distale dell'ECA e tagliarla. Bloccare il CCA e ICA con morsetti arteriolari per evitare il sanguinamento prima di creare un'incisione a forma di "V" sull'ECA utilizzando una forbice oftalmica. Inserire con cautela la sutura pretrattata con la testa in silicone attraverso l'ECA.

(4) Dopo aver rimosso il morsetto arteriolare ICA, inserire la sutura nell'ACM fino a raggiungere l'estremità, alla profondità di circa 17-18 mm (fare riferimento allo schema seguente). Secondo l'autore, la profondità stimata empiricamente dipende dal peso dell'animale. Ad esempio, per ratti di peso compreso tra 260 ge 280 g, la profondità di inserimento è di circa 17 mm; per ratti di peso superiore a 280 g, è di circa 18 mm. In breve, una leggera resistenza costituisce un segnale in quanto indica che la sutura è appena entrata nell'arteria cerebrale anteriore intracranica, bloccando l'apertura della MCA.

(5) Utilizzare il sistema di imaging laser speckle per monitorare il flusso sanguigno della corteccia cerebrale dopo l'intervento chirurgico. Le diminuzioni del flusso sanguigno del 70% ~ 80% indicano il successo dell'istituzione del modello.

(6) Cucire il tessuto sottocutaneo e la pelle dopo la legatura e la disinfezione. Rimetti il topo nella gabbia dopo che si è ripreso dall'anestesia.

(7) Solo estraendo la sutura per consentire alla testina in silicone di tornare all'ECA, è possibile ripristinare il flusso sanguigno dell'MCA, poiché il flusso sanguigno dall'ACC può essere riperfuso nell'ACM.

(8) Il modello del gruppo di controllo segue quasi la stessa procedura, mentre l'unica differenza è che la sutura non viene inserita dopo la separazione del vaso e il tessuto sottocutaneo e la pelle possono essere cuciti dopo la legatura e la disinfezione.

Il modello MCAO del topo è stabilito più o meno allo stesso modo del modello del ratto. Invece di legare l'arteria pterigopalatina, l'operatore dovrebbe regolare attentamente l'angolo per evitare l'arteria pterigopalatina durante l'inserimento della sutura. Selezionare una sutura appropriata in base al peso dell'animale e inserirla nell'ICA (10 ± 0,5) mm per garantire che la sutura sia appena nell'arteria cerebrale anteriore intracranica e blocchi l'apertura dell'MCA.

Come ridurre la mortalità nei modelli animali di ischemia cerebrale?

Il presidente della World Stroke Organization ed ex redattore capo di Stroke afferma nell'aggiornamento delle raccomandazioni precliniche della tavola rotonda dell'industria accademica sulla terapia dell'ictus che:

"Quando la gravità dell'ischemia deve raggiungere una certa soglia per l'inclusione (ad esempio una riduzione prespecificata della perfusione rilevata con flussometria laser Doppler, o lo sviluppo di compromissione neurologica di una data gravità), ciò dovrebbe essere indicato chiaramente. Di solito, questi criteri dovrebbe essere applicato prima dell'assegnazione ai gruppi sperimentali.Se per l'inclusione è richiesta una dimensione della lesione prespecificata, allora questa dovrebbe essere dettagliata, così come i corrispondenti criteri di esclusione.

L'ictus ischemico focale negli animali è tipicamente indotto dall'occlusione dell'arteria cerebrale media. Tuttavia, i modelli di occlusione dell'arteria cerebrale media, inclusi i metodi di sutura ed embolici, sono imperfetti nel causare una riduzione prolungata del flusso sanguigno. In alcune situazioni è possibile che si verifichi un'occlusione, ma ne possa derivare una riperfusione spontanea, con conseguente variabilità delle dimensioni dell'infarto. I parametri fisiologici di base come la pressione sanguigna, la temperatura, i gas ematici e la glicemia devono essere monitorati regolarmente. La temperatura deve essere mantenuta entro il normale intervallo fisiologico. È importante monitorare il flusso sanguigno cerebrale utilizzando il flusso Doppler o l'imaging della perfusione per documentare un'occlusione sostenuta adeguata e monitorare la riperfusione nei modelli di ischemia temporanea."[1]

Riferimenti

[1]Fisher M, et al. Ictus, 2009