Precauzioni per l'uso di un microtomo rotativo durante il taglio, il sezionamento e il montaggio

Il sezionamento in paraffina è la tecnica più utilizzata in istopatologia.

Il suo protocollo può essere complicato e qualsiasi mancanza in qualsiasi passaggio può influire sulla qualità del sezionamento. Nell'articolo precedente, abbiamo discusso della risoluzione dei problemi e dei suggerimenti per il sezionamento del tessuto del microtomo comune. In questo numero, daremo un'occhiata più da vicino alle precauzioni quando si utilizza il microtomo di paraffina dal taglio, taglio al montaggio, e parleremo di uno dei punti più dolenti: le sezioni alternate spesse e sottili.

1 Taglio

La rifilatura viene normalmente eseguita con uno spessore di 20-30 µm.

Si consiglia di tagliare il tessuto allo spessore di 20-30 µm.

Per tessuti più duri o tessuti più piccoli, dovrebbe essere più sottile. Un taglio standard è completato quando l'intero tessuto è esposto.

2 Sezionamento

La lama del microtomo di qualità deve essere affilata e priva di tacche e deve essere sostituita regolarmente. Questo può compensare gli errori nel processo di pretrattamento.

Prima del sezionamento: stringere il morsetto della lama, il portalama e il supporto del blocco campione e tagliare la fetta fino a quando il tessuto non è completamente esposto.

Durante il sezionamento: il volantino deve essere ruotato a velocità uniforme. se è troppo veloce, si tradurrà in uno spessore irregolare dei sezionamenti (slice jumping), indossando il portalama; se è troppo lento, addenserà i sezionamenti. Lo spessore di sezionamento è generalmente fissato a 3~5 μm. Una sezione standard dovrebbe mantenere il tessuto integro e uniforme con uno spessore uniforme. Le sezioni di tessuto incomplete possono lasciare diagnosi errate e omissioni.

Suggerimenti: la direzione del tessuto da incorporare. Gli strati del tessuto, la direzione delle sue fibre, i muscoli, ecc. Dovrebbero essere paralleli al coltello. Le parti difficili da tagliare devono essere posizionate sopra durante l'incorporamento, come l'epidermide della pelle, l'involucro della massa e la sierosa del tratto gastrointestinale per ridurre al minimo la rottura delle sezioni di tessuto. Dopo aver ritagliato le fette necessarie, le fette verranno estratte con una pinza e messe a bagnomaria o stese sulla macchina da forno.

Promemoria:

Il microtomo deve essere controllato per il corretto funzionamento prima del sezionamento. Per i tessuti duri come il tessuto decalcificato, il midollo osseo, i fibromi uterini e il tessuto calcificato, si dovrebbe utilizzare lo stesso bordo della lama ove possibile per ridurre la possibilità di danni alla lama.

Quando si allargano le sezioni o si pulisce, la spazzola deve andare verso l'alto, poiché scendendo si può facilmente causare il taglio dei fili della spazzola da parte della lama, con conseguenti danni alla lama.

3 Montaggio

Mettere le sezioni a bagnomaria per appiattirle e lisciarle. Se le sezioni continuano a incresparsi, aggiungi una soluzione alcolica all'acqua in quanto abbassa la tensione superficiale e rimuove le grinze.

La fetta di alta qualità viene prelevata e montata sulla diapositiva nella sua posizione a 1/3 da uno dei suoi lati. Il vetrino sarà etichettato per l'identificazione. La temperatura generale dell'acqua per far galleggiare le fette è di circa 40 ℃.

4 Alterna sezioni spesse e sottili

Si può dare per scontato che se lo spessore del profilato è impostato sulla macchina, le fette usciranno dello spessore desiderato, e devono essere dello spessore desiderato, altrimenti la macchina deve essere imprecisa. Tuttavia, ci sono molti altri fattori che possono causare l'alternanza di sezioni spesse e sottili.

Ad esempio, il bordo della lama non è affilato o la velocità di sezionamento non è uniforme: un sezionamento lento produce fette più spesse. Solo una lama affilata con corsa di sezionamento uniforme può garantire un sezionamento di spessore uniforme.

Inoltre, la temperatura ambiente può anche causare il riscaldamento del blocco di cera, rendendo le sezioni più spesse. In breve, sezioni alternate spesse e sottili devono essere analizzate in base alla situazione reale.

Il microtomo rotativo RWD Minux® S710 può risolvere efficacemente il problema dello spessore anomalo e garantire la qualità della sezione.

La caratteristica unica è la combinazione del sezionamento manuale e della configurazione semiautomatica, garantendo la precisione del sezionamento del microtomo, soddisfacendo le varie abitudini della maggior parte degli operatori. Riduce l'occorrenza di slice jumping nel sezionamento dei tessuti duri e garantisce la completezza e la continuità delle sezioni. Inoltre, offre una manutenzione a basso costo.