L'assorbimento fagocitico di particelle di Phrodogreen Zymosan da parte di microglia derivata da hiPSC - Incubatore Cellbox VS

Determinazione dell'esperimento Panoramica dell'esperimento

Le microglia svolgono un ruolo cruciale nella risposta immunitaria del sistema nervoso. Il loro ruolo potenziale e previsto nelle malattie è attualmente un argomento di ricerca chiave. Con un numero sempre maggiore di gruppi di ricerca in tutto il mondo che collaborano, diventa sempre più importante condividere materiale biologico di alta qualità. Questo rapporto utente confronta la morfologia e l'attività fagocitaria delle microglia trasportate in Cellbox con quelle coltivate in un incubatore stazionario.

"Il Cellbox può essere utilizzato in modo sicuro

per il trasporto di microglia umana

microglia umana derivata da iPSC, che sono cellule molto

cellule molto sensibili, da

un laboratorio all'altro"

IL PROGETTO

La capacità di migrazione delle microglia richiede una matrice 3D complessa. Con l'aumentare della complessità, aumenta anche la necessità di trasportare le cellule nelle loro strutture 3D co-coltivate. Questo rapporto d'uso è il primo passo per studiare un modo nuovo di trasportare queste cellule sensibili. Confrontando le microglia dopo il trasporto in un ambiente controllato con un gruppo di controllo proveniente da un'unità fissa, questo rapporto d'uso mira a determinare se Cellbox è un dispositivo di trasporto plausibile per strutture più complesse.

Questa relazione si basa su due esperimenti (I e II) (si veda il flusso di lavoro dell'esperimento di seguito). Nell'esperimento I, le microglia derivate da iPSC umane sono state coltivate in una Cellbox stazionaria (A) e in un incubatore stazionario (B) per 18 ore. Nell'esperimento II, la Cellbox è stata caricata con microglia derivata da hiPSC e trasportata per 48 ore (C). Come controllo, le microglia sono state coltivate in un incubatore stazionario per 48 ore (D). Dopo gli esperimenti I e II, la morfologia della microglia è stata osservata mediante microscopia a campo chiaro, mentre l'attività di assorbimento fagocitario è stata quantificata mediante l'incubazione per 24 ore di particelle di pHrodo™ Green Zymosan tramite analisi di microscopia a fluorescenza.

IL RISULTATO

L'incubazione di microglia derivata da iPSC umane nel Cellbox (senza trasporto) non altera la morfologia né la capacità fagocitaria rispetto alla microglia derivata da iPSC umane mantenuta in incubatore stazionario. Il trasporto su strada di microglia derivata da iPSC umane nel Cellbox (due trasporti: dal Belgio alla Germania e dalla Germania al Belgio) non altera la morfologia né la capacità fagocitica rispetto alla microglia derivata da iPSC umane mantenuta nell'incubatore stazionario. Inoltre, non è stato osservato alcun distacco cellulare evidente.

- Agosto 2021