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Linea cellulare di osteosarcoma immortalata con il Leica Stellaris 8 TauSTED

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Imaging a cellule vive di una linea cellulare di osteosarcoma immortalato

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Cellbox Solutions | Università di Bielefeld, Scuola di Medicina EWL

Nell'ultimo decennio i limiti della microscopia ottica sono stati superati da tecnologie rivoluzionarie. Diversi gruppi di ricerca in tutto il mondo hanno sviluppato nuovi metodi per migliorare la risoluzione per l'identificazione di eventi cellulari, in particolare nel campo dell'imaging di cellule vive. Tuttavia, i microscopi a super-risoluzione sono un tipo di attrezzatura di laboratorio molto costosa e complessa che non tutti i laboratori possono permettersi. Inoltre, possono essere necessari diversi mesi o anni per padroneggiare il funzionamento dello strumento, rendendone ancora più difficile l'utilizzo. Questa relazione descrive l'uso di un

Cellbox per trasportare cellule U-2OS da un laboratorio della Facoltà di Medicina OWL dell'Università di Bielefeld a una struttura dimostrativa di Mannheim.

"Tutti gli esperimenti di imaging pianificati

sono andati a buon fine e le cellule sono state

al microscopio come confluenti, vitali e

confluenti, vitali e con una vivace attività"

IL PROGETTO

Il vantaggio dell'imaging di cellule vive è la visualizzazione di processi cellulari transitori e dinamici, evitando gli artefatti da fissazione. In questo progetto, le cellule U-2OS (una linea cellulare immortalizzata di teosarcoma os) che esprimono stabilmente diversi costrutti genetici sono state seminate il primo giorno a 5x103 cellule/ml in vetrini μ ibidi a 8 pozzetti a 300 μl per pozzetto e in piatti da 35 mm (MatTek) a 2 ml per piatto utilizzando DMEM senza rosso fenolo integrato con 10% di siero fetale di vitello e antibiotici. Le cellule sono state coltivate per due giorni. Il terzo giorno la Cellbox è stata riempita con cellule U-2OS confluenti a 37°C e 5% di CO2. Le cellule sono state tenute nella Cellbox durante il viaggio in taxi tra l'Università di Bielefeld e la stazione centrale di Bielefeld, il successivo viaggio in treno dalla stazione centrale di Bielefeld alla stazione centrale di Mannheim e il viaggio in taxi tra la stazione centrale di Mannheim e un hotel locale per il pernottamento.

- Giugno 2023