Perché qPCR viene utilizzato per i test COVID-19 in tutto il mondo?

Quali sono i suoi vantaggi tecnici?

Con la routine dei test COVID-19, qPCR, una tecnologia all'avanguardia nella diagnostica molecolare, è diventata gradualmente universale. Questa tecnologia presenta molti vantaggi tecnici rispetto alla tradizionale PCR, rendendola il gold standard per i test COVID-19 in tutto il mondo. Quali sono i vantaggi di qPCR che lo rendono universalmente disponibile e ne mantengono l'eccellente affidabilità?

Vantaggi della qPCR

1. Basso rischio: il coperchio è aperto solo due volte durante l'intero processo, quindi il rischio di contaminazione del laboratorio è ridotto;

2. Operazione semplice: l'operazione è più semplice rispetto alle noiose fasi operative di mNGS, il che rende più facile la promozione;

3. Veloce: il DNA amplificato viene rilevato mentre è in corso la reazione qPCR, quindi non è necessario rilevarlo separatamente (es. su sefarosio) come nella PCR tradizionale;

4. Alta efficienza: qPCR è considerato un metodo altamente efficiente e, in combinazione con stazioni di lavoro automatizzate per il trattamento dei liquidi, può elaborare un gran numero di campioni in breve tempo;

5. Alta sensibilità: qPCR è in grado di discriminare una differenza di 2 volte nel numero di DNA bersaglio e può rilevare solo poche molecole di DNA iniziali. La QPCR richiede solo 1/1000 della quantità rispetto alla PCR;

6. Ampia gamma di quantificazione: può quantificare una vasta gamma su diversi ordini di grandezza;

7. Riproducibilità: è generalmente considerata altamente riproducibile.

Applicazioni di qPCR

Molte persone possono avere una conoscenza di base della qPCR solo attraverso i test COVID-19, ma la sua applicazione in realtà non può essere limitata ai test COVID-19. A causa degli ovvi vantaggi tecnici, qPCR ha una vasta gamma di applicazioni. Poiché qPCR ha una storia abbastanza lunga, vari studi ne hanno dimostrato l'affidabilità e la stabilità. Allo stesso modo, i produttori di termociclatori qPCR hanno sviluppato piattaforme di supporto e i fornitori di apparecchiature automatizzate per la gestione dei liquidi hanno sviluppato soluzioni automatizzate compatibili con qPCR.

Più comunemente, qPCR viene utilizzato nella diagnostica molecolare, dove sta lentamente sostituendo i metodi tradizionali (immagini microscopiche). Viene utilizzato per rilevare, identificare e quantificare i microrganismi (batteri, virus e funghi) che causano malattie. Con qPCR, il lavoro manuale è ridotto. Consente l'elaborazione di un gran numero di campioni in breve tempo (fino a 384 o anche 1536 reazioni per corsa) ed è un metodo insostituibile nei laboratori diagnostici. Va notato, tuttavia, che il metodo rileva solo la presenza di DNA o RNA di microrganismi, non la loro vitalità. Pertanto, le tecniche microbiologiche tradizionali sono ancora talvolta necessarie in combinazione con la PCR. Inoltre, un'altra area di applicazione molto importante della qPCR sono gli studi sull'espressione genica, che possono aiutarci a comprendere vari campi della biologia, microbiologia, medicina e altre scienze della vita.